ru uk en-us af

Категория Химическая энциклопедия  

РЕСТРИКТАЗЫ


2017-04-06 00:00:00

РЕСТРИКТАЗЫ эндодезоксирибонуклеазы рестрикции,

Распознавание чужеродной ДНК осуществляется в специ-фич. нуклеотидных последовательностях сайтах, к-рые в собственной ДНК клетки "отмечены" благодаря модификации чаще всего метилированию спец. По принятой номенклатуре рестриктазы обычно обозначают сокращенным назв. их продуцента, в к-ром первая буква-начальная буква назв. рода, две следующие-начальные буквы назв. вида и последующие - обозначение штамма и номера выделенной из него рестриктазы, напр.: HindIII—третья рестриктаза из Наето-philus influenzae d.

Рестриктазы подразделяют на 3 класса. К первому классу принадлежат ферменты напр., ЕсоК из Escherichia coli К12, узнающие специфич. последовательность сайта, но разрывающие нить ДНК в произвольной точке по-видимому, после образования комплекса с ДНК фермент неспецифически взаимод. с удаленной областью ДНК или передвигается вдоль нити ДНК. Ко второму классу принадлежат ферменты напр., EcoRI, расщепляющие ДНК в строго определенной точке но отношению к сайту узнавания. К третьему классу относят Наиб. значение имеют рестриктазы второго класса, широко применяемые в генетической инженерии и при установлении структуры ДНК. Эти ферменты мол. масса, рН оптим. каталитич. активности и рI значительно варьируют в зависимости от источника расщепляют обе нити ДНК. При этом разрыв осуществляет иногда одна молекула рестриктазы в обеих нитях, иногда-две молекулы фермента каждая атакует лишь одну нить, как, напр., EcoRI. В большинстве случаев 3`, 5`-фосфодиэфирные связи в ДНК расщепляются с образованием 5`-фосфатов на месте разрыва молекулы см. Нуклеиновые кислоты, лишь немногие рестриктазы напр., Nсil образуют фрагменты с 3`-фосфатными группами. Все рестриктазы второго класса-Mg2+-зависимые Расщепление ДНК происходит обычно в пределах сайта узнавания, редко-на определенном расстоянии от него. При этом образуются фрагменты ДНК либо с ровными тупыми концами, либо с выступающими липкими 5`- или З`-концами см. рис.. Рестриктазы с одинаковыми сайтами узнавания наз. изошизомерами.

4052-15.jpg

Схема расщепления ДНК разными рестриктазами: А, С, G и Т-соотв. дезок-сиаденозин, дезоксицитидин, дезоксигуанозин и дезокситимидин; N-любой дезоксинуклеозид, ферменты; 1-HalIII, 2-EcoI, 3-BglI, 4-HgaI.

Применение рестриктаз второго класса позволяет вырезать из ДНК определенные фрагменты, а также встраивать их в заданные места векторных молекул ДНК, т. е. направленно конструировать молекулы с новой генетич. информацией.

Лит.: Корнбсрг А., Синтез ДНК, пер. с англ., М., 1977, с. 298-305; Баев А. А., Таняшин В.И., Федор И., в сб.: Итоги науки и техники, сер. Молекулярная биология, т. 12, ч. 1. Генетическая инженерия, М., 1979; Kessler Оh, Neumaier P.S, Wolf W., "Gene", 1985, v. 33, № 1, p. 1-102.

А.И.Гуревич.

Отправить сообщение об ошибке
Если нашли ошибку в тексте выделите ее мышкой и нажмите сочетание клавиш Ctrl+ENTER, укажите правильный текст без ошибки.





Похожие статьи

 ОРБИТАЛЬ
 ЛКАО-ПРИБЛИЖЕНИЕ
 ОРИЕНТИРОВАННОЕ СОСТОЯНИЕ ПОЛИМЕРОВ
 БАРИЯ СУЛЬФАТ
 



Сайт является частным собранием материалов и представляет собой любительский информационно-образовательный ресурс. Вся информация получена из открытых источников. Администрация не претендует на авторство использованных материалов. Все права принадлежат их правообладателям